細胞培養(yǎng)恒溫振蕩器等常用器材
細胞培養(yǎng)過程中有哪些器材或者媒介我們可以利用呢?一般分為:水、PBS、胰蛋白酶溶液、恒溫振蕩器、CO2培養(yǎng)箱,這幾類可以幫到我們的實驗。
以下簡單介紹以下各種媒介的作用:
1、水:細胞培養(yǎng)用水必須非常純凈,不含有離子和其他的雜質(zhì)。需要用新鮮的雙蒸水、三蒸水或純凈水。
2、PBS :主要用于免疫組化染色時組織或細胞的漂洗。
3、胰蛋白酶溶液:胰蛋白酶的作用是使細胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細胞離散。不同的組織或者細胞對胰酶的作用反應(yīng)不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關(guān),在pH為8.0、溫度為37℃時,胰酶溶液的作用能力zui強。使用胰酶時,應(yīng)把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細胞損傷。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白質(zhì)克降低胰酶的活性。終止消化時,可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細胞的作用。稱取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液濃度為0.25%,用電子天平準確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水中。攪拌混勻,置于4℃內(nèi)過夜。4、恒溫振蕩器的應(yīng)用:體外培養(yǎng)的細胞和體內(nèi)細胞一樣,需要在恒定的溫度下生存,大多數(shù)情況下,恒溫振蕩器zui適溫度是37℃,溫差變化一般不應(yīng)超過±0.5℃,細胞在溫度升高2℃時,持續(xù)數(shù)小時即不能耐受,40℃以上將很快死亡。因此需要有能控制溫度的恒溫振蕩器,如具有較高靈敏度的恒溫振蕩器及CO2培養(yǎng)箱。
5、CO2培養(yǎng)箱是細胞培養(yǎng)的*儀器,它為細胞提供了一個體外培養(yǎng)的舒適環(huán)境,如適宜的溫度、濕度、酸堿度、CO2濃度等。細胞在體外培養(yǎng)時很容易受到各種細菌、微生物的感染,因此,CO2培養(yǎng)箱的滅菌和抑菌能力就顯得尤為重要。